本文標(biāo)題:"熒光顯微技術(shù)能夠直接、及時(shí)觀察細(xì)胞膜的變化"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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FRET原理是一熒光物質(zhì)(donor)受到特定波長(zhǎng)的光線(xiàn)照射后會(huì)被激發(fā)而發(fā)出另一特定波長(zhǎng)的光,
此能量轉(zhuǎn)移的距離約7-10 nm,在此距離內(nèi)若有一接收者
(acceptor)則此能量會(huì)被吸收,而熒光減弱。FRET廣泛應(yīng)用于膜蛋白的研究
藉由donor與acceptor標(biāo)識(shí)在欲觀察的分子上,便可由熒光強(qiáng)弱知道兩種
分子結(jié)合與混合程度。Fluorescence quenching與FRET的原理類(lèi)似,
這類(lèi)熒光分子在高濃度(~70mM)彼此距離接近時(shí)會(huì)發(fā)生分子之間會(huì)發(fā)生self-quenching的現(xiàn)
象而讓熒光減弱,而在低濃度時(shí)熒光較強(qiáng)。Fluorescence quenching經(jīng)常被運(yùn)用到
微胞洩漏實(shí)驗(yàn),當(dāng)細(xì)胞膜上有破洞產(chǎn)生時(shí),如果熒光分子外洩?jiǎng)t濃度降低,
因而造成熒光強(qiáng)度變化。FRAP的原理是在細(xì)胞膜的局部區(qū)域,
以激光光源集中激發(fā)局部區(qū)域, 讓其造成分子局部的熒光漂白,再來(lái)測(cè)量熒光回復(fù)的速度。
而從回復(fù)的速度可以知道脂質(zhì)分子擴(kuò)散速率,進(jìn)而了解細(xì)胞膜相變的機(jī)制。
相較于前面所提的熒光技術(shù),熒光顯微技術(shù)是一個(gè)能夠直接、及時(shí)觀察細(xì)胞膜上
變化的技術(shù)。當(dāng)人造膜上有兩種區(qū)塊共存時(shí),
被標(biāo)識(shí)的熒光分子會(huì)選擇停留在特定的區(qū)塊而產(chǎn)生熒光分部不均勻,
來(lái)提供足夠的反差來(lái)觀察人造膜上區(qū)塊尺寸大小、形狀與動(dòng)態(tài)行為
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